PCR, atawa réaksi ranté polimérase, nyaéta téknik anu digunakeun pikeun ngagedékeun runtuyan DNA.Ieu mimiti dikembangkeun dina 1980s ku Kary Mullis, anu dileler Hadiah Nobel Kimia dina 1993 pikeun karyana.PCR parantos ngarobihkeun biologi molekular, ngamungkinkeun para panalungtik ngagedékeun DNA tina conto-conto leutik sareng diajar sacara rinci.
PCR nyaéta prosés tilu-léngkah anu lumangsung dina cycler termal, mesin anu gancang bisa ngarobah suhu campuran réaksi.Tilu léngkah nyaéta denaturasi, annealing, sareng ekstensi.
Dina lengkah kahiji, denaturasi, DNA untai ganda dipanaskeun nepi ka suhu luhur (biasana kira-kira 95°C) pikeun megatkeun beungkeut hidrogén nu nahan dua untaian babarengan.Ieu ngakibatkeun dua molekul DNA untai tunggal.
Dina lengkah kadua, annealing, suhu diturunkeun ka kira-kira 55°C pikeun ngidinan primers pikeun anneal kana runtuyan pelengkap dina DNA untaian tunggal.Primer nyaéta potongan DNA pondok anu dirarancang pikeun cocog sareng sekuen anu dipikaresep dina DNA target.
Dina lengkah katilu, extension, suhu naékkeun ka sabudeureun 72 ° C pikeun ngidinan Taq polymerase (sahiji tipe DNA polymerase) pikeun nyintésis untaian anyar DNA tina primers.Polimérase Taq diturunkeun tina baktéri anu hirup di cinyusu panas sareng tiasa nahan suhu luhur anu dianggo dina PCR.
Sanggeus hiji siklus PCR, hasilna mangrupa dua salinan runtuyan DNA target.Ku ngulang tilu léngkah pikeun sababaraha siklus (biasana 30-40), jumlah salinan runtuyan DNA target bisa ngaronjat sacara éksponénsial.Ieu ngandung harti yén sanajan jumlah leutik awal DNA bisa diamplified pikeun ngahasilkeun jutaan atawa malah milyaran salinan.
PCR ngagaduhan seueur aplikasi dina panalungtikan sareng diagnostik.Hal ieu dipaké dina genetika pikeun nalungtik fungsi gén jeung mutasi, dina forensik pikeun nganalisis bukti DNA, dina diagnosis kasakit tepa pikeun ngadeteksi ayana patogén, sarta dina diagnosis prenatal pikeun layar pikeun gangguan genetik dina fetuses.
PCR ogé parantos diadaptasi pikeun dianggo dina sababaraha variasi, sapertos PCR kuantitatif (qPCR), anu ngamungkinkeun jumlah DNA diukur sareng transkripsi ngabalikeun PCR (RT-PCR), anu tiasa dianggo pikeun ngagedékeun sekuen RNA.
Sanaos seueur aplikasina, PCR ngagaduhan watesan.Merlukeun pangaweruh ngeunaan runtuyan udagan jeung desain primers luyu, sarta bisa rawan kasalahan lamun kondisi réaksi teu dioptimalkeun leres.Nanging, kalayan desain ékspérimén anu ati-ati sareng palaksanaan, PCR tetep janten salah sahiji alat anu paling kuat dina biologi molekular.
waktos pos: Feb-22-2023